时间：2023-03-14 15:18:31
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论文摘要 总结了苏云金杆菌的发现及杀虫机理，对苏云金杆菌的研究现状、研究中存在的问题及解决的思路进行了阐述，并对苏云金杆菌的应用前景进行了展望。
新型微生物农药作为无公害农林生产资料，在未来的农作物病虫害防治方面将有巨大的市场需求。进一步加快微生物农药的研制、产业化和推广应用进程，降低农药在农副产品中的残留和对农田生态环境的污染，实现农作物重大病虫害的可持续控制，必将产生巨大的社会、经济和生态效益。
1苏云金芽孢杆菌(Bt)的发现及杀虫机理
1.1苏云金芽孢杆菌(Bt)的发现
1901年日本学者石度繁从患猝倒病的家蚕幼虫中分离到第1个产生晶体的芽孢杆菌。10年后Berliner从德国苏云金地方一家面粉厂染病的地中海粉螟中分离到一个相似的菌株，并正式定名为苏云金芽孢杆菌(Bt)。4年后，一个叫克林诺的科学家发现，在这种细菌的细胞中可以形成方形或菱形的晶体，可惜这个发现并未被重视。直到40年后的1953年，一位叫汉纳的生物学家证明了这种晶体是有毒的蛋白质晶体，才揭示了粉螟死亡的原因。在1920~1930年间，Bt作为微生物杀虫剂主要用来防治玉米螟。1938年第1个商品制剂Sporeine在法国问世，从此拉开了生物杀虫剂的序幕。以后相继发现了对鞘翅目、螨类、同翅目、膜翅目、直翅目昆虫、动植物寄生线虫、鞭毛虫、变形虫、吸虫、绦虫有毒杀作用的Bt菌株。
进一步的研究发现，Bt是革兰氏阳性菌，另外，它可寄生在一些蛾类和蝶类的幼虫上，甚至是植物表面。
苏云金芽孢杆菌分泌出的由Cry基因编码的、有杀虫活性的δ-毒素(或被称为杀虫晶体蛋白)的蛋白结晶构成了内孢子。Cry蛋白对鳞翅目(如蛾与蝶)、双翅目(如苍蝇、蚊子)和鞘翅目(甲虫)有很大杀伤力。因此，可将苏云金芽孢杆菌发酵生产制成高效生物杀虫剂，或用Cry基因制成防虫害的转基因产品。
1.2苏云金芽孢杆菌(Bt)的杀虫机理
苏云金芽孢杆菌(Bt)之所以能够杀虫，是由于它们的细胞内存在着一种有毒的蛋白质，叫做伴孢晶体，昆虫吞食后就会中毒而死。而这种活细胞及伴孢晶体对环境无毒无害。因为在动物的胃肠道内，酸性环境下蛋白质晶体不能溶解，从而对人畜无害。所以它是一种高效安全的生物杀虫剂，可用来杀灭多种农作物害虫。苏云金芽孢杆菌(Bt)杀虫机理主要是:昆虫取食苏云金芽孢杆菌后，杆菌在其胃肠道内产生蛋白质晶体内毒素(δ-内毒素)、热稳定毒素(β-外毒素)、叶蜂毒素(α-外毒素)及Bt-γ外毒素。这些毒素能侵蚀昆虫肠道细胞，破坏肠道内膜，并进入血淋巴组织，使害虫因饥饿而出现败血症最后死亡。苏云金芽孢杆菌的防治对象是鳞翅目、膜翅目、双翅目、鞘翅目等多种害虫，其药性的持效期可达7~10d左右。需要特别注意的是:苏云金芽孢杆菌(Bt)及其制剂对蚕具有很高的毒性，桑园必须禁用。另外，勿与碱性杀菌剂混合施用，晴天的傍晚或阴天施药效果最佳。
2苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究现状
2.1苏云金芽孢杆菌(Bt)的研究主要集中在分子水平上
过去Bt是作为一种制剂应用于农林害虫的防治，随着生物技术的发展，现在已对苏云金芽孢杆菌的杀虫蛋白质和相关基因作了深入而透彻的研究，也就是说在基因的水平上对它有了更多的了解。研究发现，在其体内具有一种Cry基因，正是这种基因编码产生的蛋白质对上述昆虫具有极大的毒性，所以这种基因的结构和特性就影响到它本身，也影响到它的杀虫范围。当然某一基因的长期应用会刺激昆虫产生抗体。因此，现在对苏云金芽孢杆菌的研究更多地集中在分子水平上。 转贴于
2.2国内主要研究成果
中国现在在苏云金芽孢杆菌杀虫剂的商品化生产和防治农林害虫的系统工作方面，取得的主要成果有:研制和生产质优价廉的Bt悬浮剂和高效价的粉剂，实现了中国Bt杀虫剂的商品化生产;建立了以生物测定为基础的产品毒力效价测定的质量标准化技术化系统;研究了助剂及贮存条件对Bt的影响，为助剂的筛选和有效存贮提供了可靠的依据;大规模推广应用Bt杀虫剂以防治棉、粮、果疏及林业害虫，并取得了良好的效果。该研究中研制和生产的适合中国的优质廉价的Bt悬浮剂，已在农林害虫防治中得到广泛应用;Bt粉剂的毒力效价和防虫效果，已达到国际同类产品先进水平;以棉铃虫和小菜蛾为标准昆虫，建立了中国Bt产品质量标准化测定技术系统，为国产Bt杀虫剂的行业标准的建立奠定了良好基础，为与Bt杀虫剂国际质量标准接轨提供了保障。
3研究中存在的问题及解决的思路
3.1主要问题
苏菌基因的表达会发生变化。例如，如果温度不理想，就可能降低毒素的产生，使植物易受侵蚀。更加严重的是，试验证明毒素减少的晚季植物会形成启动子的DNA甲基化。 另外，毒素的持续使用会使普通害虫演化为抗性虫。试验发现，小菜蛾对苏菌毒素的喷雾形式就已产生抗性。
苏菌毒素的运用还有一些可能的危险，如:如果转基因玉米与变异野草杂交，苏菌基因的抗性就有可能因食物链来到食草动物群落中，蜂群衰竭失调(CCD)，也可能跟苏菌转基因作物有关。
3.2解决的思路
(1)有抗植株与无抗植株间种。减少害虫抗药性的一个有效方法就是将有抗植株与无抗植株间种，目的是减少抗性基因频率，牺牲少量无抗植株保证产量。美国和欧洲的某些区域已经立法要求使用上述方法种植。这种方法的理论依据是假设抗性基因是隐性的。依目前来看，这种方法应该可以延迟害虫对苏菌的抗性;另一方面，假如产生了多种苏菌毒素的农作物可以完全灭绝害虫，抗性基因的存在也就不可能了。不过，至今为止，害虫灭绝的情况还未出现。
(2)通过接合构建新菌株。苏云金芽孢杆菌菌株的特定质粒可以自行转移，这些质粒可以通过接合来构建新菌株。例如，科罗拉多马铃薯甲虫(鞘翅目)是北美最具破坏性的马铃薯害虫，欧洲玉米螟和土豆块茎蠕虫，对马铃薯也有很大的破坏作用。从自然界中分离的苏云金芽孢杆菌菌株，没有一个菌株对所有这些昆虫都具毒性。然而，通过质粒转移杂交，现在已经构建出对3种害虫都有效的新菌株，田间试验表明，该菌株作为广谱的马铃薯杀虫剂很有前途。
4苏云金芽孢杆菌(Bt)的应用前景
微生物农药是21世纪农药工业的新产业，代表着植物保护的方向，其最大的优势在于能克服化学农药对生态环境的污染，并减少农药在农副产品中的残留量。同时，在推广微生物农药应用过程中，农副产品的品质和价格将大幅度上升，有力地促进农村经济增长和农民增收，社会效益不可估量。
我国是一个农业大国，农业的发展事关重大。为了更好地落实科学发展观，建立环保型、节约型农业，微生物农药将为农产品优质安全生产和降低有毒物质残留提供技术和物质保证。微生物农药研究与发展，将有效地实现农产品的优质安全生产，提升农产品的经济附加值，扩大我国农副产品外销市场，推进绿色产业的发展。所有这些均对发展农村经济、增加农民收入、促进农村繁荣具有重要的推进作用。
参考文献
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【关键词】 反义 寡核苷酸 乳腺癌 HER2 mRNA 紫杉醇
0 引言
乳腺癌的化学治疗近年来有了长足的进展，然而，经多线治疗仍复发转移的晚期患者的治疗，仍然十分棘手。探索包括生物靶向治疗在内的新疗法已成为近年研究的热点之一。
本研究室的前期研究表明，以HER2 mRNA为靶点的特异性硫代反义寡核苷酸，可以抑制HER2过表达乳腺癌细胞株增殖活性[1]。本研究拟对既往合成的反义寡核苷酸HA6722 单用或与紫杉醇联用时的抗乳腺癌活性进行研究，试图探索乳腺癌治疗新方法。
1 材料与方法
1.1 细胞系及培养
本研究采用的细胞株有：MDAMB453（HER2过表达），细胞培养所需的培养基为L15（Gibco， BRL），内含10%的胎牛血清（FCS，Hyclone），置37℃、不含CO2的培养箱中培养；MDAMB231（HER2低表达）的体外培养采用RPMI1640（Gibco， BRL）培养基，内含10%的胎牛血清（FCS，Hyclone），置37℃、含体积分数为5%的CO2培养箱中培养传代。当细胞生长至80%～85%融合时用0.25%胰蛋白酶消化，传代和收集细胞。
1.2 硫代反义寡核苷酸的合成及体外脂质体转染
反义寡核苷酸的靶向HER2 mRNA反义寡核苷酸HA6722序列为含20个核苷酸的寡聚核苷酸，其命名原则及合成见文献报道[2]。全程硫代修饰，由北京赛百盛基因技术有限公司合成。序列如下：HA6722：5′CAG CAG CCG AGC CAG CCC GA3′
琼脂糖凝胶电泳结果表明反义寡核苷酸纯度符合要求。反义寡核苷酸以无血清无抗生素的L15或RPMI1640培养基溶解浓度为50μmol·L-1的溶液，过滤除菌，-20℃储存，临用时稀释至所需浓度。
反义寡核苷酸体外脂质体转染按Invitrogen， Gibco BRL公司脂质体转染说明书所述方法进行。当培养细胞达到65%～70%融合时，进行转染，具体方法见文献[3]。
1.3 紫杉醇 由海南海药公司提供，30mg/支，临用时以无菌生理盐水稀释成所需浓度。
1.4 噻唑蓝（methyl thiazolyl tetrazolium， MTT）法检测细胞活度 取对数生长期的上述细胞，以不同数量接种96孔培养板（Costar，USA），接种数量分别为：MDAMB453 5×104/孔、 MDAMB231 2×104孔。实验组及对照组细胞培养均设三个平行孔。待细胞生长至65%～70%融合时，用脂质体2 000将不同浓度的HA6722转染细胞4～6h，再加入同摩尔浓度的紫杉醇，随后继续培养24～72h，倾去培养液，加新鲜配置的MTT溶液（0.5mg/ml）200μl，继续孵育4h，吸去MTT溶液，每孔加200μl DMSO， 轻轻震荡20～30min，酶联仪测定光吸收值（OD值）。
1.5 细胞凋亡（apoptosis）检测 凋亡试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。以100nmol·L-1的HA6722及紫杉醇分别单独处理MDAMB453细胞12h，以及用50nmol·L-1的HA6722和相同浓度的紫杉醇先后作用MDAMB453乳腺癌细胞6h，收集经紫杉醇及HA6722单药或联合作用后的MDAMB453乳腺癌细胞，离心涂片，按操作说明检测细胞凋亡。细胞核内出现棕褐色沉淀为阳性，反之为阴性。凋亡指数（AI）=（凋亡细胞数/计数总细胞数）×100%。
1.6 反义药物及紫杉醇的疗效评价
对数生长期的MDAMB453细胞及MDAMB231细胞经系列浓度的HA6722及紫杉醇单用或联合作用后， MTT法测定OD值。紫杉醇单用时的系列终浓度为1、4、16、64、250及1 000nmol·L-1，而HA6722单用时的系列终浓度为12.8，32，80，200，500，1 250nmol·L-1；联合应用时二者以等摩尔浓度混合，系列浓度依次为6.4、16、40、100、250及625nmol·L-1，反应终体积为200μl。生存分数f按下述公式计算：f=ODtreat/ODcontrol(1)
联合方案的疗效评价按有关文献进行[4，5]，即以log(1/f1)对log（药物浓度）作图，并行线性拟合，得曲线的x轴截距即为log（IC50），和直线斜率m，利用下述公式计算产生效应f时的单药及联合时的药物浓度：Dosef=DoseIC50[(1/f)1]1/m (2)
由于联合方案采用的是固定摩尔浓度比，因此产生效应f的药物浓度可分解为联合药物的浓度（D）1和（D）2，对于产生任一效应f时的药物联合指数(combine index，CI)可以下列公式算出：
CI＝（D）1（Df）1＋（D）2（Df）2＋α（D）1（D）2（Df）1（Df）2(3)
式中（D）1和（D）2分别代表联合用药产生效应f时的浓度，而（Df）1和（Df）2分别代表药物单用时产生效应f时的浓度；根据推测两药不排斥或相互排斥的可能，α取值1或0；CI反映二药联合的相互作用，大于1表示拮抗，等于1表示相加，小于1表示协同。全部试验均进行3次以上重复。
1.7 统计学处理
采用SPSS10.0统计分析软件进行统计学处理，实验数据以±s表示，均数比较采用Student’s t检验和方差分析F检验（One Way Anova）。
2 结果
2.1 HA6722及紫杉醇单用时对两种乳腺癌细胞的抑制作用
在1、4、16、64、250及1 000nmol·L-1的终浓度下，紫杉醇对两种乳腺癌细胞的生长均显示剂量依赖性抑制作用，其抑制的IC50值分别为19.4±4.1nmol·L-1及23.6±5.7nmol·L-1，见图1A；而在12.8、32、80、200、500、1 250nmol·L-1的系列浓度作用下，HA6722对两种不同HER2表达水平的乳腺癌细胞的体外生长的影响迥然不同，对HER2过表达的MDAMB453细胞呈现明显的剂量依赖性抑制，而对HER2低表达的MDAMB231细胞则几乎没有抑制， IC50分别为47.6±7.9nmol·L-1和731.8±14.3nmol·L-1(n=3，P＜0.01，见图1B。
2.2 HA6722及紫杉醇乳剂合用对MDAMB453乳腺癌细胞的抑制作用
从上述初步结果可以看到，12.8nmol·L-1浓度的HA6722对MDAMB453细胞的抑制率只有4.7%，因而该浓度被作为非治疗浓度用于增强紫杉醇的药理作用研究，结果表明，由于该浓度HA6722的加入，紫杉醇对MDAMB453细胞的抑制作用增强，IC50值由19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1（n= 3，P＜0.05）。
等摩尔浓度的HA6722与紫杉醇合用的研究表明，经6.4、16、40、100、250及625nmol·L-1的两种药物共同作用，MDAMB453细胞增殖呈现更为明显的抑制，见图2 A、B、C。在IC50浓度下的联合指数CI为0.85±0.16(n=3)，在研究涉及的全部药物浓度范围内，两种药物的联合指数波动在（0.85±0.11）～（0.87±0.27）之间，见图2D。
转贴于
为了澄清HA6722与紫杉醇协同抗肿瘤作用是否具有细胞选择性，对HER2低表达的乳腺癌细胞株MDAMB231细胞也进行了同样的研究，结果表明，等摩尔浓度的二种药物合用对该细胞株的联合指数在所检测的药物浓度下，波动在（1.13±0.21）～（1.19±0.24）之间，见图3。
2.3 HA6722及紫杉醇乳剂合用对MDAMB453乳腺癌细胞凋亡的影响
经100nmol·L-1的HA6722及紫杉醇分别单独处理或以50nmol·L-1的HA6722和相同浓度的紫杉醇先后作用MDAMB453细胞后，TUNEL法对细胞凋亡的检测显示，HA6722与紫杉醇合用增强了细胞的凋亡作用（n=3，P＜0.05），见表1。
3 讨论
业已证明，原癌基因HER2过表达是一个独立的、不良的预后指标，将导致乳腺癌患者对某些化疗方案耐药[6]，生存期缩短[7]。
图1 紫杉醇及反义寡核苷酸HA6722单用时对两种乳腺癌细胞株，MDAMB453及MDAMB231细胞体外增殖的影响（略）
图3 等摩尔浓度的HA6722与紫杉醇合用时对MDAMB231联合指数随生存分数的变化曲线（略）
图2 紫杉醇和HA6722单用或联合时对MDAMB453细胞增殖的影响（略）
表1 HA6722与紫杉醇单用或联合应用对MDAMB453细胞凋亡的影响（略）
MDAMB453组*P
紫杉醇是一种新型的抗微管集聚剂，是当前乳腺癌治疗中疗效较高的药物之一。然而，由于绝大部分细胞毒药物存在剂量限制性毒副作用（DLTs），因而单用化疗药物不但无法治愈肿瘤，而且还会产生严重的毒副作用。事实上，一度被认为乳腺癌根治希望所在的大剂量化疗（HDCT）加干细胞支持疗法也并没有达到根治甚至是有效改善乳腺癌患者预后的目的[8]。
生物靶向治疗近年逐渐成为研究的焦点，以bcl2等基因为靶点的反义药物G3139已在体外及体内研究中均显示出明确的抗肿瘤作用，并可增强细胞毒药物的抗肿瘤效果[9，10]。如采用反义药物与细胞毒药物联合的办法，能在不影响抗肿瘤效果的前提下，降低细胞毒药物的用量，减少或避免毒性反应的发生，不失为一种两全的策略。本研究对反义药物HA6722与细胞毒药物紫杉醇对乳腺癌细胞体外增殖进行了相关研究。结果表明， 以低剂量（非治疗剂量）的HA6722与紫杉醇联合，可以引起紫杉醇抗MDAMB453细胞增殖活性的明显增强，IC50值由19.4±4.1nmol·L-1降至13.6±5.2nmol·L-1（n=3，P＜0.05）；而等摩尔浓度的上述两种药物联合，其对MDAMB453细胞的抗增殖作用较之两倍浓度的单药作用更强。在IC50浓度下两药的联合指数CI为0.85±0.16(n=3)，表明二者合用对HER2过表达的MDAMB453细胞的抑制作用是协同的。
本研究对两种药物合用时对乳腺癌细胞的凋亡过程进行了观察。结果表明，合用时MDAMB453细胞凋亡率明显强于二药之一的单独应用，与文献报告一致[11，12]。
本研究尚对另外一种HER2正常表达细胞MDAMB231细胞进行了研究，结果表明，HA6722和紫杉醇合用并未引起抗肿瘤活性的增强，进一步说明，这两种药物的协同抗肿瘤作用，是以乳腺癌细胞的HER2基因乃至受体过表达为前提，其详细机制有待于进一步研究。
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【关键词】四氢生物蝶呤；心肌缺血再灌注损伤； 三磷酸腺苷敏感性钾通道；
一氧化氮合酶
Role of the tetrahydrobiopterin in Myocardial preconditioning: Possible Involvement of Mitochondrial KATP Channels and Nitric Oxide Synthase
ZHONG Biao1, ZHONG Huan-qing2, CHEN Hai-sheng2.
1.Department of Thoracic and Cardiovascular Surgery, Huizhou Municipal Central Hospital, Huizhou, Guangdong Province, 516000, China
2.Department of Cardiovascular Surgery, Gaozhou People’s Hospital, Maoming, Guangdong Province, 525200, China
【Abstract】ObjectiveTo study the effect of tetrahydrobiopterin(BH4),5-hydroxydecanoate (5-HD) and Nω- nitro-L-arginine methyl ester(L-NAME) on langendorff rabbit heart model. MethodsSixty-four mature rabbits were randomly divided into four groups. The hearts in vitro removed to Langendoff equipment, then perfused with different buffer solution base on the Krebs-Henseleit buffer(KHB) for 30min. Then cardiac arrest was induced for 30min followed by 60min reperfusion. Coronary flow(CF) was recorded. Coronary effluent solution was collected for CK measurion. The dynamic change of myocardial NO content was measured. ResultsBy the treatment with BH4, CF was significantly increased, and CK was decreased than other groups after reperfusion(P
【Key words】 Tetrahydrobiopterin; Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury; ATP-Sensitive Potassium Channels; Nitric Oxide Synthase
BH4是所有NOS同功酶的辅助因子，具有稳定NOS结构、稳定NOS活性二聚体、增加L-精氨酸和NOS结合力、促进NO的合成与释放等作用，与内皮功能密切相关[1,2]。外源性补充BH4能保护缺血再灌注心肌[3]，但是具体作用机制仍不清楚。本实验通过观察四氢生物蝶呤(tetrahydrobiopterin, BH4)、5-羟基癸酸盐(5-hydroxydecanoate, 5-HD) 和左旋硝基精氨酸甲酯(Nω-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)对缺血再灌注心脏冠脉流量（coronary flow, CF）、一氧化氮(nitric oxide, NO)含量、肌酸激酶（creatine kinase, CK）的影响，研究线粒体三磷酸腺苷敏感性钾通道(mitochondrial ATP-sensitive potassium channel, mitoKATP) 、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)对四氢生物蝶呤减轻心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）作用的影响，探讨四氢生物蝶呤保护缺血再灌注心肌作用的可能机制。
1 材料和方法
1.1 实验动物与分组
健康成熟的大白兔64只(广东医学院动物中心提供，体质量2.0~2.5 kg，雄雌各半)，随机数字表法随机分入对照组（组Ⅰ）和BH4组（组Ⅱ）、BH4+ L-NAME组（组Ⅲ）、BH4+5-HD组（组Ⅳ），每组16只。
1.2 主要仪器和试剂
自制Langendorff离体心脏灌注装置，全自动生化分析仪(美国Beckman公司, CX-4 型)，L-NAME、5-HD、BH4购自美国Sigma公司。NO检测试剂盒购自南京建成生物有限公司。
1.3 离体心脏Langendorff灌流模型
实验动物3%戊巴比妥钠(30 mg/kg)麻醉，肝素钠(150 IU/kg)抗凝后，迅速开胸取出心脏，立即浸入4℃ K-H液中，排尽残血，连接于Langendorff模型灌注装置上，以37℃ K-H液经主动脉插管逆行灌注30 min，灌注压恒定为70 cm H2O，灌注液持续通入95%O2-5%CO2混合气(流量3 L/min)。停搏前20 min BH4+ L-NAME组（组Ⅲ）、BH4+5-HD组（组Ⅳ）分别用加入L-NAME、5-HD的K-H液进行灌注10min。停搏前10 min BH4组（组Ⅱ）、BH4+ L-NAME组、BH4+5-HD组均用加入BH4的K-H液灌10 min。经30 min灌流后，灌注40 ml 4℃ St. Thomas心脏停搏液进行停搏，时间30 s。心脏停跳期间温度保持在37℃~38℃。心脏缺血30 min后，以37℃ K-H液再灌注60 min。
BH4、5-HD、L-NAME最终浓度为10、100、100 μmol/L。
1.4 观察指标及方法
1.4.1 在灌注10min、再灌注10 min、再灌注30 min、再灌注60 min4个时点收集冠脉流出液记录冠脉流量CF。
1.4.2 全自动生化分析仪分析上述4个时点冠状动脉流出液CK含量。
1.4.3 分别取缺血30 min、再灌注60 min的心室肌，硝酸还原酶法测定心肌组织NO含量。
1.5 统计学处理
数据以均值±标注差（ ±s）表示，用SPSS 13.0软件进行统计学分析。组间、组内数据比较均用方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1与对照组相比，用含BH4的K-H液灌注的组Ⅱ再灌注后的CF、心肌组织NO含量增加(P
2.2使用含NOS抑制剂L-NAME（组Ⅲ）或mitoKATP抑制剂5-HD（组Ⅳ）预处理，与组Ⅱ相比，CF降低(P
3 讨论
内、外源性NO在缺血预适应(ischemia preconditioning, IP)心肌保护中(包括早期、第二期)起重要作用，不仅是触发因子，也是效应因子[4]。机体内产生的NO是由NOS催化非必需氨基酸左旋精氨酸(L-arginine, L-Arg)和O2生成的。BH4是所有NOS同功酶的辅助因子 [1-2]。内源性NO的生成量严格依赖适当的BH4水平[5]。BH4水平的减少可导致NOS功能失调，产生过量的氧自由基而代替NO的产生，进而导致内皮和心肌细胞功能降低[6]。
CK绝大部分存在于心肌细胞胞浆内，心肌细胞以外含量甚微，是一种心肌特异性酶。所以，检测冠脉回流液中CK的含量可以反映心肌酶漏出的程度，间接反映心肌损伤程度[7]。CF的多少则可反映冠状动脉的扩张程度，从而观察冠脉内皮细胞的功能和损伤程度。
mitoKATP被公认为是心肌保护作用中的一个关键环节[8]。mitoKATP的开放不仅参与IP的第一窗保护作用，而且也参与第二窗保护作用，不仅能作为启动因子诱导IP，同时也是IP重要的效应器。它的开放能减轻MIRI [9]。
实验结果提示外源性BH4可提高NOS的活性，促进内源性NO的产生，发挥NO对心肌和冠状血管内皮的保护作用，减少CK的漏出，增加CF。表明BH4能增强冠脉系统的扩张，有利于停搏液在心肌的均匀分布和降温，而在再灌注时则促进有害物质排出，减轻心肌酶的漏出，从而减轻心肌损伤，而这种保护作用也与mitoKATP的开放有关。
参考文献
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2021年保险公司转正工作总结
记录是最好的一种督促自己成长的方式，记录也是最好的见证自己成长的方式。莎总说：没有记录就没有发生。从今天起，坚持写工作日志，试问你自己就不写工作日志，你怎么能要求外勤伙伴写呢?你有什么资格?一天不重要，十天不重要，一个月，一个季度，一年呢?学会养成自己的工作包括生活的习惯。每天坚持将自己的工作，分为新人档案，绩优档案，主管档案进行记录。我今天要做什么?我今天做了些什么?他们今天要做什么?他们今天做了些什么?有没有达到预期值?有哪些东西需要马上更正或者是补充的建立自己的工作模式，工作线条，刻不容缓!
记录，是一笔财富。计划性的记录与总结性的记录更是一笔财富。
除了上述的这些，当然还有很多很多的感悟，以及感悟后后期要做，比如客户经营，客户经营不仅仅是计划1的经营，作为一名组训，更多更重要的是将客户经营的概念植入到我们自己，植入到业务员的骨髓深处，___产说会没有人，其实就是客户经营出了问题。除了每天检查工作日志外，还要检查客户档案并辅导建立和完善客户档案，还包括客户的紧急联络卡，方便拓展客户。
当然也还有学到实战性的课程寿险与家庭财务规划。我们的客户到底在烦恼什么：是买车或者是还房贷重要还是买保险重要?以客户的心理分析问题，因为客户往往只___自己面对的问题;家庭的风险并不仅仅是___问题，是的，您买房需要钱，您孩子的教育需要钱，您的养老需要钱，其实您的一生哪都需要钱，那你就必须需要有一个专业的金融工具提供帮助。老祖宗说：要留足过冬的粮食，可是储存的地方不好，会留存到冬天吗?第一次深刻懂得：保险的目的不是改变生活，而是防止现有的生活被改变。很多人都追求有钱有权，李双江有钱吗?有，有权吗?有，可是他快乐吗?不快乐!重点看钱怎么用。确实，听郑老师的家庭财务规划，让你觉得你就是在与客户心与心之间的对话。如果我们的绩优能做到这一点，如果我自己能让我们的外勤伙伴做到这一点，保险市场将是何其之大，何其之广!
要说感悟和启发，还有很多很多，那就把这还有很多很多的感悟和启发___，落实到工作行动当中吧。一路走来风雨人生，曾经的困苦和挫折化为前行的力量，感受了生命蜕变的痛楚和成长的喜悦，让我不断的成长进步充实.
为期四天的培训，总公司给本次培训倾注了大量心血，配备了强大的讲师阵容，生话上的无微不至，学习上的倾囊相授.足见对我们的重视和关爱!通过对行业前景展望的学习，知道了蓬勃发展的___;感受了生命力量中的生命速度生命现象生命奇迹;明白了家庭财务规划一定要站在利他行善的立场上，才能更好地为客户保驾护航;懂得了专业化销售流程辅导，对新人专业系统实战的意义所在，更好地唤醒客户的潜在需求;理解了只有用心经营好客户管理，分清ABCD类客户有的放矢，培育好影响力中心，才能唯有源头活水来;领悟了一切成交来自于服务的内涵。
在这个没有硝烟的寿险战场上，群雄逐鹿诸候争霸。通过对绩优建设的学习，才知善抓新人者长、善抓主管者久、善抓绩优者强的含义所在。让理念、架构、节奏、模式植入脑海并身躬力行;用好公司的荣誉体系和节点方案，实现季度、月平台的维持和增长。应该说团结就是力量，共识才能共为，营业区的保费和稳步发展一定来自高效会议经营。因为只有统一思想才有战斗力。在这个无利不起早的浮躁时代，用好基本法帮外勤精打细算，激发内心欲望启动意愿而更好更快地升官发财，实现可持续发展。牢记一个人不愿意承受工作压力，就永远地承受生活压力的警钟;用空杯心态同时放大空杯容纳万物，且行且思且感且悟!
应该说本次培训非常实战实用实际，我们来这里不但是学习，更重要的是做到学有所知学有所行学有所悟，求新求变求发展。把知识转化为生产力，让外勤队伍获得能量更好地展业增员，才是自己存在的价值。这就要求我不能只做语言上的巨人，行动上的矮人。只有勇敢地承担责任，才能承担更大的责任地。内勤松一尺外勤就会松一丈，就更需要我们意志坚定充满___以终为始，做个有心人。同业务员抱成一团打成一片然后举一反三，做好四训一会，季经营月经营周经营日经营的细化和量化，协助营服经理做好份内份外的工作。
万丈红尘三杯酒，千秋大业一壶茶，大道无疆大方无域，在人生的舞台上，人生因梦想而伟大，因务实而成真。如何叫长河为酥酪变大地为黄金?珍惜身边的人眼前的人，只要你敢想敢做，敢超越敢创新，则一切皆有可能!
但一切从一名组训做起，一名站着能讲、坐着能写、躺着能想的合格、优秀的组训。
今天，当我重新理解这段话的含义，便发现它被赋予了更深刻的内涵，那就是爱岗敬业，无私奉献。今天，我要赞美这么一群人，她们就是国寿的全体巾帼女员工。
伴随着国寿业绩的蒸蒸日上，在日常工作中，她们作为普通员工没有惊天动地的壮举，工作也都是点点滴滴，却无处不体现着平凡而闪光之处，在干练而和善的外表下人人都有一颗积极进取和勇于奉献的心---爱岗敬业为国寿,争优创先铸辉煌。
我在国寿分公司工作二十二年，国寿巾帼女职工们干一行爱一行、吃苦耐劳、爱岗敬业的精神，深深感染着我。就拿我们国寿的柜面之星张志丽来说吧，工作好几年，经验丰富，屡受客户的好评。当大家夸奖她时，她总是谦虚地说：“过奖了，要做好服务，使客户满意还要努力。”她这么说，也这么做。一有空总是学习，学习各种知识，学习说话，做到音准字美。是啊，柜面工作就是要服务好客户，要有丰富渊博的知识回答客户的各种提问，要回答如流，让客户放心满意；说话温柔情真意切，让客户感到亲切愉悦。真诚服务是我们工作的出发点和归宿，所有的客户都是我们的上帝。我们要做到用心服务，微笑服务。用心服务就是要求我们用自己的思想，用自己的知识，用自己的技能，全心全意，毫无保留地服务好客户的所有要求。微笑服务就是要求我们用自己的声音，用自己的情感，赢得客户心。我们要用真诚服务赢得客户，为公司创造效益，也为我们自己酿造甜蜜的生活。
随手翻开国寿女同志们的工作笔记，只见上面密密麻麻地记录着客户的具体情况。星期天，本来我们可以陪着家人，孩子度过快乐的时光，可是我们知道客户更需要我们。我们去看望他们带去的不只是去收取保费，更重要的是他们需要的保障。我记得，曾经这样说，“作为一名国寿职工能给别人送去保障，我觉得我们的付出真的很值了！”是啊，还有什么比这重要呢？
创先争优的力量来自大家的相互扶持、相互协作。当一位女同志生了病，这时，其他几名女同志会主动承担起她的工作，甚至得知有同事生病后，轮换休息的同事们也纷纷主动打电话回单位要求继续工作……她们全身心扑在工作上却顾不了自己的小家，有的女同志孩子还小需要照顾，她们把自己家庭的事情全部交亲人代管。每次完成一项任务，国寿的巾帼姐妹们都更加的努力，更加的团结，因为，在她们的心中都有一个坚不可摧的信念---众志成城，创先争优。
从我们中国人寿发展现状来看，国寿女职工最需要的就是大无畏的挑战精神与争先创优的气魄，胸怀目标、矢志不移的坚定信念，无所畏惧、勇往直前的工作态度，心系国寿、患难与共的爱岗敬业情怀。为着争先创优，让我们放下心中的等待和彷徨,让我们在体会爱岗敬业的潮涌中全身心地投入到中国人寿事业中去，让我们学习那些曾经的爱岗巾帼楷模并记录在心间，作为我们励志奋斗的坐标,伴随着我们去实现心中那份平凡而伟大的理想。
中国人寿带给了我们不同于众的人生，经历了不同的工作岗位，对工作的感悟也就更加深厚。也许生活的意义，不仅仅是为了生存，而是给个人的生活赋予意义，给自己的生命赋予光彩。十五年前，我们的职业生涯面临着新的选择，新的岗位、新的环境，一切对我们来说都是陌生的，同时又是充满挑战的。在我们努力学习、不断提升自我的同时，也深深体会到了工作的压力和艰辛，但是身边姐妹门的互相鼓励和互相帮助,让我们变得更加坚强；我们明白，这种工作阅历带来的人生财富是无法用金钱来衡量的。坦然地接受工作带给我们的一切，除了益处和快乐，还有艰辛和忍耐---这就是工作的意义……中国人寿带给了我们耕耘的艰辛和收获的喜悦，使我们的人生更加丰富多彩，使我们在生活的历练中变得更加成熟和睿智。面对收获，面对成功，我们感受到了自身价值的实现；面对困难，面对压抑和不愉快，我们感受到了成长的代价……
“美是到处都有的。对于我们的眼睛，不是缺少美，而是缺少发现”。学会观察社会、观察生活、认识事物。
学生认识的不仅仅是课文中“九百”、“银丝”、“断掉”这样的文字。教学过程中，通过声音、影像等情景创设，置身绝壁，感悟台阶的漫长、陡峭、危险，人行尚且艰难，扫路人劳动环境的艰辛可想而知，崇敬、尊重、爱怜、心碎等复杂感情交织在一起，纯洁而感伤的情感会在心中升起，净化心灵，陶冶情操教学目标自然实现。
如果小学生的表达失去了心灵的自由和本真的情思，“立意”愈高，人格将会愈低。让学生的表达反映自己的生活是天然合理的，也是最有教育意义的，最吸引人和感动人的，从根本上来说这样的学生表达自然是健康的。
二、尽情倾吐，无拘无束
我一直坚持以“让学生畅所欲言为本”，减少对学生的束缚，为学生的创造一个自由的空间，尊重学生的每次表达，利用一切机会欣赏课文，欣赏他人、欣赏自我，为他们提供一个自由感悟的舞台。
课文中“一上一下一千八百多级。……游客们气喘吁吁……望而却步。”年过七旬的扫路人，在这样环境中求生，还说“不累，不累”。难道他不想退休过上孙儿绕膝，安享晚年舒逸生活；学生们自己也在思考，他能享受退休工资吗？有保险吗？不是工人60岁就得退休吗？他70多岁了还要在这么危险的环境中扫路，难道他不担心自己生命安全吗？他之所以说不累，是不是害怕领导认为他不能胜任，辞退他，反而失去生存的依靠？……学生把想说的话尽情倾吐，极大限度地激发学生说的积极性，既培养学生的情商，又为学生写作积累情感基础，是语文教学生活化、时代化、直观化的一条可行之路。
三、感悟人生，净化心灵
生活处处是文章，事事练达皆学问。在情景创设教学中，有的学生接受能力强，表达水平提高比较快，有的学生表达水平很难提高。如何令这部分学生由不会说到会说呢？成为我关注的问题。
课文说“天游峰是武夷山的第一险峰。”许多游客望而却步，作者顺着银丝上了峰顶，心里正在得意之时，看见一位面色黝黑，瘦削的脸，身穿一套褪色的衣服，足蹬一双棕色的运动鞋的老人，正借着淡淡的星光用一把竹扫帚淡然的清扫着路面。黑、瘦、衣服褪色、星光等文字告诉读者，老人生活清苦，劳动时间特殊，要等游客下山才能清扫台阶，早上为新来的游客扫清路面，晚上打扫上山游客留下的垃圾，他工作平凡，心灵高尚；他不辞辛劳，无怨无悔；如果游客人人爱护环境，不仅是对老人的帮助，也是在帮助游客自己，净化游客的心灵。学生们畅谈自己感受，联系身边的大事小事，气氛活跃，好不热闹！
打开心灵的窗户，真情地感悟人生的甘甜与辛酸！成就他们的人生，育人的功能得到发挥。
四、深层感悟，以悟促说
说出心理真实感悟是教改探索的一种境界。课文中，老人悠然地说：“我早该退休了。可我实在离不开这里……有花鸟作伴，我能舍得走吗？”。学生感悟到老人豁达、自信、悠然；也感悟到老人艰难、辛酸、无奈；许多人感悟到老人崇高、无私、奉献！
读罢此文，纵使你真产生“辛酸”的感悟，也不能证明老人扫路生活辛酸。现实生活中许多老人以助人为乐，不计报酬，他们的胸怀与情操不是我们一把人能感悟透的！
阅读下面的文字，根据要求作文。
2008年3月31日，中央电视台《艺术人生》剧组来到泰山录制“清明特别节目”。结束时，特约嘉宾，北京师范大学教授于丹发表登山感悟：山登绝顶我为峰。这不仅是登山的境界，也应该是每个人的豪迈气概。另一位特约嘉宾，《百家讲坛》评《三国》的主讲易中天的感悟则是：人生就像登山，不一定每个人都能爬到山顶，但爬了就好；不一定每个人都要登到山顶，但一定要一步一个脚印。
要求全面理解材料，但可以选择一个侧面、一个角度构思作文。自主确定立意，确定文体，确定标题，不少于800字；不要脱离材料的含意作文，不要套作，不得抄袭。
写作指导
我们对这则材料的审题可以有如下的立意：
于丹的角度：①勇攀高峰，志存高远 ②要有奋勇争先的豪迈气概 ③争强好胜，永不服输 ④勇立潮头，做社会的变革者 ⑤成功属于不屈不挠者
易中天的角度：①做任何事情都重在参与②走好人生的每一步 ③力所能及了无遗憾 ④量力而行，尽力就可 ⑤享受过程，别有洞天
“横看成岭侧成峰，远近高低各不同。”材料的意义多了，确定自己的观点时，一定要注意找出一个对自己写作有利的角度去写。也就是说作者在选择最佳切入点时，既要考虑最佳角度，也要考虑最适合自己展开的角度，即别人少有顾及的意向而自己却感悟最深、有话可说且能把话说好的角度。
另外，写作时，为了保险，最好能引用材料中和你的角度、观点相关的句子加以分析、假设，这样立论就扣住了“不要脱离材料的含意作文”的要求。观点有出处，有来由，言之有理，容易得到阅卷人的认可，否则极易被判为偏题。准确理解材料的含意，根据自己的知识储备、生活经历和思想认识选定作文中心（选取材料中的一个“意义点”），即可构思作文。
例文展示
参与，就是好的
♥黄灵
参与了挑战，才能证明自己；
参与了奋斗，才能领悟快乐；
参与了……
顾拜旦曾对奥运大家庭写下这样一句话：参与，就是好的。易中天也曾感悟：人生就像登山，不一定每个人都能爬到山顶，但爬了就好。顾拜旦的话和易中天的感悟，都说明了同一个道理：做任何事都重在参与。参与，就是好的。
参与也能证明自己
谁说一定要成功才能证明实力，谁说一定要获得金牌才能证明自己？一位年近40岁的短跑女将从未获得奥运金牌，但她已参与了五届奥运会，当她站在年轻人中间时，格外抢眼，她顽强拼搏，敢于挑战并享受着参与奥运会的快乐，赢得了众人的喝彩。
没有金牌的光芒，没有奏响的国歌，但她的参与精神已然引起关注；没有顶尖的成绩，没有年轻的实力，但她的参与精神足以赢得掌声！参与就是好的，一样能证明自己。
参与也能领略快乐
前两届CCTV模特大赛，出现了一位妈妈级参赛选手。为了丰富自己的生活，她走上了舞台，因年龄的原因，她自然比不过年轻貌美的其他选手，但是她在参与的比赛中，都能自信、微笑地走台，感受着参与的快乐。被淘汰时，她说：“我的过程是在探索，参加比赛就是重在参与，参与了就是最棒的，我很快乐，收获到了很多东西。
……
参与也能收获经验
北京奥运会开幕之后的第一个比赛日，浙江小将孙扬站在了“水立方”的赛场上，开始了他奥运会的“处子秀”。 对于今年才16岁的孙扬，毕竟大赛经验还非常缺乏，小组预赛结果，孙扬3分50秒90，小组排名第七。尽管无缘决赛，但作为年轻的潜力选手，能参加奥运会，对他，已经是一种成功。这次参赛经历将让孙扬收获了宝贵的经验。
他的教练娄红梅说：“这次奥运会，对孙扬是一种成长和锻炼，会让他收获一些大赛的经验，逐步成熟起来。”娄红梅对这位弟子充满了信心，相信他通过这次经验的积累，在今后的比赛中，会有更好的发挥。
参与能证明自己，感悟激情，领略快乐，收获经验，它将成为我们一生的财富，美好的回忆。
可以说，爬上山顶是强者，但未登顶的也不意味着失败。登山，注重的是登山的过程，登山的乐趣在于参与其中所领略的沿途风景，所付出的努力，收获的快乐。
参与，让我们成为了风景中的一部分；参与，让我们创造了快乐的过程。
参与，就是好的！
1 激励学生自己学数学
现代心理学研究表明：任何学习都是学习者自主建构的过程 。在这个过程中，离不开学习主体与文本之间的交互作用。有意义的接受学习是自主建构。有意义的发现学习也是自主建构。在学习过程中，既没有绝对的接受学习，也没有绝对的发现学习，总是两者相互交替，有机结合的。在这个过程中，建构主义强调学习者主动接触外界的信息（包括课本），并用自己已有的知识与经验去解读这些信息，从而赋予认识对象以心理意义，如讲平方差公式时，先在屏幕上打出： ① （1+2x）（1-2x） ② （2a+3）（2a-3） ③ （100+1）（100-1） ④ （x+3）（x-3）让学生比赛计算，看谁做得又快又好，并且让学生自己找找看看，存在什么规律，当你找到规律时，"平方差公式"就找到了。（学生个别学习3分钟）。接下来，分组讨论交流想法。得出结论：（a+b）（a-b）=a2-b2。在交流的过程中时中，学生交流的不仅仅是知识，同时还包含方法方面的交流，情感态度价值方面的交流，并且记录下自己的设想。这种交流达到了更大范围的资料整合。这样，在教学中学生做到手到、眼到、口到、心到，学会了认真看书、仔细观察、用心思考、用心体会的好习惯，真正学会"读"数学书。
2 激发学生"用数学"
新课程提倡学生初步学会从数学的角度提出问题，理解问题，并能综合应用所学的知识技能解决问题的发展应用意识。随着社会主义市场经济体制的逐步形成。股票、利息、保险、分期付款等经济方面的数学问题，已日渐成为人们的常识。因此数学教学不能视而不见，不管实际应用，这样恐怕就太不合时宜了。
学生学习知识是为了用知识。但长期的应试教育使大多数学生不知道为什么学数学，学数学有什么用。因此，在教学时，我针对学生的年龄特点、心理特征，密切联系学生的生活实际，精心创设情境，让学生在实际生活中运用数学知识，切实提高学生解决实际问题的能力。如在讲"圆周角定理推广的应用"时，首先创设情境"老奶奶不慎把一个圆形的玻璃镜子掉在地上，打成了不易带走的几块碎片，老奶奶很着急。你能想办法帮助她吗？把碎片重新拼成新的圆形的镜子吗？你能用学过的数学知识解决这个问题吗？"――"破镜重圆"是生活中很实在的问题，老师引导学生把课堂所学的知识和方法，运用到生活实际中，鼓励学生把生活中碰到的实际问题带到课堂，尝试着用数学方法解决，并注重解决问题策略的多样性，这既有利于挖掘学生的潜力，又有利于培养学生初步创新能力。经常这样训练，使学生深刻地认识到数学对于我们的生活有多么重要，学数学的价值有多大，从而激发了他们学好数学的强烈欲望，变"学数学"为"用数学"。
2 引导学生感受体验数学
尊重学生的不同感受及其思考的方向，引导学生主动地富有个性地学习。如在学习"函数"时，我首先举出生活中函数关系的例子，引导学生感受生活当中的变量及变量之间的关系。对于变量，每个学生的感受是不同的。因此学生举出很多生活中的变量的例子。
刚刚把郭初阳老师的《一个独立老师的语文之旅》看完了，合上书，感觉是一种幸福和一种幸运——能够安静的读书，能够读到这样好的书，遇见这样好的思想。
对于当前的教育体制，中小学教材，郭初阳老师有很多的批判，显然非常的沉重，这个体制，体制内的很多措施，比如教材的选择，时间的规定，教师的教法，很多都在侵蚀着学生们，这无疑是让人心忧痛心的。但是不知是他的书即使全是批判但仍有希望的缘故，还是我习惯从乐观的角度去考虑问题的缘故。我并没有感到特别的痛苦。反而增了一些希望与信心。
诚然，这个教育体制有很多的弊病，需要变革，但如何不变革呢？身为一个小小语文老师的我，无法去改变，那么我能做什么，让学生们少受这个体制的残害呢？这是我要思考的。
比如，我们无法选择使用哪种教材，但我们可以改变怎么去教，可以在有限的权力与范围内选择更多更好的文章或者说教材内容让我们的学生品悟（即我们可以用批判的眼光去看待文本，用渊博的知识去筛选文本），可以用更科学更合理的方式去教授。我们可以让学生不仅接触教材，他们可以接触更多，只要我们努力。总之，我们可以尽己所能，去改变我们能改变的。这是我的感悟。
这段时间在一直在看书，看了书之后就想写点东西，表达我的感悟，感想。虽然文笔不好，感悟不深，甚至颇多错误，但是写的冲动却是实实在在的。这使我发现，我们的学生为什么觉得写作文是最痛苦的事，为什么写的东西感觉是干巴巴的拼凑呢，我想，关键是他们没有阅读，因为阅读与写作是相辅相成的啊，离开了阅读，写作只是一潭死水。正如朱熹先生所说，"问渠那得清如许，为有源头活水来。"所以要想提高学生的写作能力，唯有让他们多阅读，然后才能发于声。
书读完了，权且书摘一些吧。
1. 倘若中小学时期，就能有科学的方式来谈论这个重大的话题（指死亡教育），辅以一些优秀的文本，比如图画书《爷爷的天使》小说《马提与祖父》等等，那该多好，因为死亡教育犹如一支小小的疫苗，能极大地增强生命体的抵抗力。
2. 死亡教育，绷紧了生命之弦，让人懂得珍惜生命中的每一天，努力寻找自己一生的意义。
3. 死亡教育的内容：生命历程；生命与死亡的意义；死亡主题的音乐、文学、绘画等艺术鉴赏；自杀及其预防；如何面对亲属或朋友的死亡；丧葬文化；保险与遗嘱等。可以采用案例、影片、文学作品等。如《死亡的新意义》，菲费尔
4. 一定要打开视野，营造尽可能开放的课堂，将尽可能多的资料纳入课堂。文本是开放的，文学、电影、音乐、动画以及生活中正在发生的事件……形式上也是开放的，传授、讲座、观摩、阅读、商议、辩论、话剧、社会调查实践……在这个过程中，教师不要轻易发表自己的观点，尤其要克制自己，不要将陈旧而不自知的观点，灌输给了孩子，应该让他们在各种观点的透明罗列中，自由选择属于他们自己的观点。
5. 教师要打开自己，保持心灵的开放，用自己真实的生活与真切的思考，与孩子们建立联系，在完整而不分裂的自我中，编织一张有凝聚力量的网。在他的课堂中，没有人拥有绝对的真理，而每个人都有要求被理解的权力，每个人的生活经历的每个重要线索都得到尊重。
6. 生活与文学有着各自的原则：生活要尽量计算成本与收益，坚持精力节省原则；文学要尽量使人恢复对生活的敏感，"使石头显出石头的质感",坚持陌生化原则。两条原则，前者要求节约时间、创造财富，后者要求延长时间、醒觉生命。——我的理解：文学源于生活，但又让人高于生活。
7. 艺术真实，并不是等于低级的准确，艺术有属于自己的内在真实；只满足与形似到乱真，拘泥于无足道的细节表现的画家，将永远不能成为大师。……优秀的艺术家，有的是持久、深入、广泛的观察——加倍的观察。
8. "我的时间":我在一个巨大而透明的容器里面，想拔腿逃跑，脚已被埋住。 事实上，沙已没到腰部了，只能动弹不得地看着它一点点往上涨。 更多的沙从上面撒下来，抬头看，依稀可见一只灰黑色的瘦骨嶙峋的手掌，就是从它的指缝里，不断有沙子密密地降下。只要屏住呼吸，就能听到这细雨般微弱的沙沙声。 我还有多少时间。
9. 饮着狂泉（饮了此水，无不狂）长大的摇身为教师的我们，是否正暗藏着火艾针药，聚谋共执我们的孩子，对他进行着痛苦的治疗呢？这是我们无可补救的罪。
10. 我们过去的日子并非空虚，我们的日子像白米，每粒都是艰难，然而粒粒充实饱满。
11. 我们应当知道，再伟大的教师也不过是人，要自知己身的限度，圣女小德兰自比为一朵小百花，特蕾莎嬷嬷说自己只是一支铅笔。跌倒后又站起、破碎了方愈合、心里作难的教师，深知三折肱为良医的道理，带着自己的伤痕，来更温柔地帮助那未成年的孩子们。
